O SALSA MLPA Probemix P060 SMA Carrier é um ensaio semiquantitativo de diagnóstico in vitro (IVD) 1 ou somente para uso em pesquisa (RUO) 2 para a detecção de deleções ou duplicação nos exons 7 e 8 do gene SMN1 em DNA genômico isolado de amostras de sangue total periférico humano, amostras pré-natais, de líquido amniótico (não) cultivado obtido na 16ª semana de gravidez ou mais tarde, livre de contaminação sanguínea de vilosidades coriônicas (não) cultivadas, livre de contaminação materna, sangue fetal ou gota de sangue seco (DBS). ) cartões. P060 SMA Carrier destina-se a estabelecer ou confirmar uma causa potencial e diagnóstico clínico de Atrofia Muscular Espinhal (SMA), testes de portadores e testes genéticos moleculares de familiares em risco. Esta mistura de sondas também pode ser utilizada para a detecção de alterações no número de cópias dos exões 7 e 8 do gene SMN2 , como um auxiliar de interpretação para a determinação do número de cópias de SMN1 . Este transportador SALSA MLPA Probemix P060 SMA contém 21 sondas MLPA com produtos de amplificação entre 154 e 342 nt, incluindo duas sondas para SMN1 e SMN2 e 17 sondas de referência que detectam sequências fora desta região.- A sonda SMN1 Exon 7 14919-L17081 (183 nt) é a sonda mais importante, pois pode ser usada para determinar o número de cópias SMN1 , o que é importante para deduzir o diagnóstico de SMA e o status da portadora. Esta sonda é específica para SMN1 e não fornecerá nenhum sinal significativo em SMN2 . A sonda tem seu sítio de ligação na transição C-T no éxon 7, que é o sítio que afeta o splicing do RNA em SMN2 .

– A sonda SMN1 Exon 8 14881-L17082 (218 nt) é capaz de distinguir entre SMN1 e SMN2 no éxon 8 (transição G para A). O sinal desta sonda indica o número de cópias do exão 8 de SMN1 . Em aproximadamente 95% das amostras, o número de cópias detectado pelas sondas do exão 7 e do exão 8 de SMN1 é idêntico. Esta sonda do exon 8 de SMN1 não pode ser usada para quantificar o número de cópias de SMN1 , pois uma mutação do exon 8 ainda resultará em uma proteína funcional. Somente a sonda do exon 7 do SMN1 deve ser usada para determinar o número de cópias do SMN1 . Na maioria dos 5% restantes das amostras, a conversão gênica entre SMN1 e SMN2 resultou em um gene quimérico contendo a sequência do exon 7 de SMN1 e o gene SMN2.sequência do éxon 8. Tal gene híbrido resulta numa proteína funcionalmente idêntica à proteína SMN1.

– A sonda SMN2 Exon 7 14921-L17083 (282 nt) identifica o número de cópias do éxon 7 SMN2 , que auxilia na detecção de eventos de conversão genética. O número de cópia SMN2 não influencia o status da operadora SMA.

– A sonda SMN2 Exon 8 14878-L17084 (301 nt) identifica o número de cópias do éxon 8 SMN2 , que auxilia na detecção de eventos de conversão genética. O número de cópia SMN2 não influencia o status da operadora SMA.