PerfeCTa qPCR FastMix, UNG é um coquetel de reação 2X concentrado e pronto para uso que contém todos os componentes, exceto primers, sonda(s) e modelo para sistemas de PCR quantitativos em tempo real que não requerem um corante de referência interno. O tampão e os estabilizadores proprietários foram otimizados especificamente para fornecer máxima eficiência de PCR, sensibilidade e sinal fluorescente robusto com a química da sonda TaqMan® ou TaqMan MGB ao usar tempos de ciclo de PCR rápidos e volumes de reação reduzidos. Isso proporciona maior economia de reagentes e rendimento laboratorial em sistemas qPCR convencionais ou de taxa de rampa rápida. A especificidade aprimorada deste FastMix suprime a reatividade cruzada entre sequências homólogas, melhorando a detecção e a discriminação em aplicações SNP. Um componente chave deste FastMix é a polimerase de DNA AccuFast Taq. Este Taq de início a quente contém uma mistura patenteada de anticorpos monoclonais que se ligam à polimerase e a mantêm inativa antes da etapa inicial de desnaturação da PCR (> 48 horas em temperatura ambiente). Semelhante à nossa DNA polimerase AccuStart Taq, esses anticorpos são irreversivelmente inativados durante a etapa inicial de desnaturação da PCR. No entanto, ao contrário de outras polimerases de arranque a quente de anticorpos, a ativação do AccuFast Taq é instantânea a 95ºC. A rápida recuperação da Taq DNA polimerase totalmente ativa e não modificada é crítica para uma cinética de extensão eficiente. A replicação de fragmentos de até 200 pb é concluída em menos de 20 segundos a 60ºC. Além disso, a mistura dNTP neste FastMix contém dUTP no lugar de dTTP. A inclusão de uracil-N-glicosilase (UNG) evita a amplificação da contaminação de transporte de PCRs anteriores contendo dU.